MTT、CCK8法
MTT是3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide的简称,商品名为噻唑蓝。
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。
然后采用二甲基亚砜(DMSO)溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在570 nm波长处测定其光吸收值,反映活细胞数量。
在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
CCK8法原理是WST-8四唑盐(2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)- 3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium)能被活细胞内的脱氢酶还原成橙色甲臜染料,
然后测定450 nm下的吸光值,生成的甲臜的量与活细胞数量成正比。
CCK8法可以做6天左右的生长曲线,1-6天每天收取细胞样本检测。
也可以类似MTT法,在相同时间比较不同处理组。